期刊简介

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  • 杂志名称:实用肿瘤学杂志
  • 主管单位:哈尔滨医科大学
  • 主办单位:黑龙江省肿瘤医院
  • 国际刊号:1002-3070
  • 国内刊号:23-1212/R
  • 出版周期:双月刊
期刊荣誉:黑龙江省第七届期刊优秀文章编辑暨第四届期刊装帧设计奖评选活动中荣获一等奖一项、二等奖两项期刊收录:知网收录(中), 上海图书馆馆藏, 国家图书馆馆藏, 维普收录(中), 万方收录(中), CA 化学文摘(美)
实用肿瘤学杂志2010年第03期

比较70%乙醇与中性甲醛固定对肺癌组织DNA质量影响的实验研究

谢至;陈志红;郭爱林;董嵩;陈世良;陈志勇;宗飒;唐红艳;严红虹;张绪超

关键词:70%乙醇, 甲醛, DNA提取, PCR, 肺癌
摘要:目的 由于常规10%中性甲醛固定的组织DNA提取质量较低,易发生断裂或降解,不利于保存及长片段DNA扩增.本研究比较70%乙醇与中性甲醛固定法对DNA质量及后续PCR的影响.方法 取70%乙醇固定的肺癌组织30例(其中10例固定7天以上),10%中性甲醛固定的自身配对癌组织30份.采用试剂盒提取DNA,分析条带完整性和纯度,并用PCR扩增HBB(beta globin)及SERPINA9(an-titrypsin)两基因的不同长度片段,用琼脂糖凝胶电泳分析扩增产物.结果 70%乙醇固定组的基因组DNA经电泳条带整齐未见明显降解,而10%中性甲醛组DNA条带弥散,有可见降解.后续普通PCR扩增268 bp、536 bp的产物显示乙醇同定组产量明显高于10%中性甲醛固定组.实时荧光定量PCR也显示在扩增123 bp、251 bp、346 bp三个不同长度片段时乙醇同定组产量均明显高于10%中性甲醛固定组(P<0.01).中性甲醛组DNA在扩增346 bp长度片段时成功率下降至47%(14/30).乙醇固定时间长短对DNA的antitrypsin模板质量无明显差异.结论 70%乙醇固定法对肺癌组织DNA保存效果优于中性甲醛法,且更适合长片段DNA扩增.长时间乙醇固定法对DNA质量无明显影响,可适合于长途运输生物标本.